蜂王浆是公认的可供人类直接服用的高活性成分的营养食品。10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)是蜂王浆中特有的一种不饱和脂肪酸，由于这种酸在自然界的其它物质中没有，只存在于蜂王浆中，所以也称为王浆酸。分离出的纯王浆酸呈白色晶体，在新鲜的蜂王浆中多以游离形式存在，性质比较稳定，具有较好的杀菌、抑菌、抗疲劳、抗衰老作用和抗Ai、抗放射的功能，为此许多保健食品均添加有蜂王浆。因此作为评价蜂王浆及其制品质量优劣的主要指标之一的10-HDA含量测定显得尤其重要。目前，比较通用的是HPLC法。液相法处理简单、结果准确，润扬仪器公司基于以上情况，建立了超声提取、冷藏沉淀后，用对羧基苯甲酸乙酯做内标，反相液相色谱法测定蜂王浆及其制品中10-HDA含量的方法，取得了令人满意的结果。
一、仪器主要配置和检测分析条件：
(1)、主要仪器配置：
1、LC-3000高效液相色谱仪；2、色谱柱：C18，250*4.6*10 或250*4.6*5；3、高速离心机（大于4500r/min；50ml）4、超声波震荡仪；5、涡旋混合器；6、分析天平（万分之一）；7、溶剂过滤器（带0.45um有机、水系过滤膜和真空）。
（2）、主要试剂：
纯净水、甲醇、乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、10-HAD标准品
（3）、色谱条件：
色谱柱为Kromasil C18 柱，流动相为V(甲醇):V(水):V(磷酸)=55:45:0.2，流速1.0ml/min，对羧基苯甲酸乙酯作内标，检测波长210nm。本法简单、快速、准确，重现性好，回收率高(97.6%～101.8%)。
（4）.样品处理
样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀，取约0.5g，置于已称定的50ml容量瓶中，称定，加0.03mol/L盐酸1ml和水2ml，置漩涡混合器上混合使样品溶解，加无水乙醇30ml，边加边轻轻摇动，再加入内标溶液10ml，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，立即置超声波中超声15min，或置漩涡混合器上振荡15min，取出，在3000r/min下离心10min后测定。如不能及时测定，应放置在冰箱中冷藏待测。 |
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