Hoechst33342染色液
Hoechst 33342也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O· 3HCl·3H2O，分子量为615.99，CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也用于普通的细胞核染色、DNA染色。
Hoechst 33342的*大激发波长为346nm，*大发射波长为460nm，Hoechst 33342和双链DNA结合后，*大激发波长为352nm， *大发射波长为461nm。Hoechst33342染色液(含封片剂)可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色，无需封片操作。
Hoechst33342染色液
操作步骤(仅供参考)：
(一)固定的组织细胞染色
1、对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst33342染色液(含封片剂)，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积以上的Hoechst33342染色液（含封片剂），充分混匀。
2、室温放置5～8min。
3、轻轻吸除Hoechst33342染色液(含封片剂)。
4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次。
5、无需封片，直接在荧光显微镜下观察。
(二)活细胞染色
1、取96、24、6孔板培养细胞至合适状态,按96孔板加入100ul、24孔板加入500ul、6孔板加入1ml的比例，加入适当的Hoechst 33342染色液，染液必须充分覆盖住细胞。
2、在适宜于细胞培养的条件下培养20～30min。
3、轻轻吸取Hoechst 33342染色液（含封片剂）。
4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。
5、无需封片，直接在荧光显微镜下观察。
Hoechst33342染色液
注意事项： Hoechst33342染色液(含封片剂)的浓度适用于各种常规染色的需要。
荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。
避免反复冻融，否则容易失效。
Hoechst 33342对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Hoechst33342染色液
染色结果：细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。 |
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