大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代)是青岛海博生物公司再次改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌和大肠菌群的快速检测。大肠杆菌显蓝色至紫色,大肠菌群显红色,革兰氏阳性菌被抑制。
成份(g/L)
特殊营养物质
33.0
显色剂
0.3
琼脂
13.0
pH 7.0±0.2 25℃
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*佳的结果。
用法
称取本品 46.3g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。取1ml制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45-50℃ 培养基约 15ml,混匀,凝固后,再加入一层培养基进行履盖。
或冷却至 45-50℃ 时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在 37℃ 的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml,涂布于培养基上,36℃ 培养 18~24h。
操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液 1ml 加入冷却至 45-50℃ 显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36℃培养 18~24h,选用有 30~200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群和大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色或黄色菌落 ;总大肠菌群=蓝色菌落+紫色菌落+粉红色菌落 大肠杆菌=蓝色菌落+紫色菌落;
4、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36℃ 培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装 4种x4套)。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色至淡粉红色。制备好的平板呈无色半透明固体培养基,稍有些沉淀物。
2、微生物试验
在 36℃ 培养 18~24h 小时:
质控菌株
ATCC
生长情况
菌落颜色
金黄色葡萄球菌
25923
-/+
无色
大肠杆菌
25922
+++
蓝色
沙门氏菌
14028
+++
无色
阴沟肠杆菌
23355
+++
粉红色
产气肠杆菌
35029
+++
粉红色
弗氏柠檬酸盐杆菌
43864
+++
粉红色
肺炎克雷伯氏菌
10031
+++
粉红色
方法的局限性
本培养基鉴定大肠菌群/大肠杆菌,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色菌落。 |
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