一、概述
试剂盒用于检测猪血清或者血浆中Senecavirus A A (SVA)抗体。试剂盒原理是基于间接ELISA方法，酶标板上已经包被SVA蛋白重组抗原，添加样品后，样品内的抗体能与板上包被抗原特异性结合形成抗原抗体复合物，并与后面加入的酶标二抗结合，二抗上的酶再催化底物显色，显色深度与样品中的抗体含量成正相关。
二、试剂盒规格及组分
〖试剂盒组分〗 〖10039-02〗〖10039-05〗〖储存温度〗
〖抗原包被板SVA antigen-Coated Plate〗〖2*96〗 〖5*96〗 〖4°C〗
〖阳性对照（红盖） Positive Control〗〖2管〗 〖5管〗 〖4°C〗
〖阴性对照（白盖） Negative Control〗〖0.2mL〗 〖0.5mL〗 〖4°C〗
〖酶标二抗HRP-Conjugated Antibody Solution〗〖24mL〗〖58mL〗〖4°C〗
〖10X稀释液10X Diluent Solution〗 〖12mL〗 〖28mL〗 〖4°C〗
〖检测稀释液 Assay Diluent〗 〖20mL〗 〖50mL〗 〖4°C〗
〖20X洗板液 20X Wash Solution〗 〖56mL〗 〖120mL〗 〖4°C〗
〖TMB底物 TMB Substrate〗 〖24mL〗 〖58mL〗 〖4°C〗
〖终止液 Stop Solution〗 〖24mL〗 〖58mL〗 〖4°C〗
备注：如果试剂盒超过一个月不使用建议阴阳性对照和酶标二抗-20°C储存。
三、试剂以及样品制备
1X稀释液：用9体积的蒸馏水稀释1体积的10X稀释液，得到1X稀释液。
1X洗板液：用19体积的蒸馏水稀释1体积的20X洗板液，得到1X洗板液。
样品血清/血浆预稀释：在血清稀释板上使用1X稀释液将样品血清稀释10倍，例如将20uL的血清加入到180uL的1X稀释液中混匀，备用。
阳性对照：取出回温30分钟后，每管加入65ul 1X稀释液，振荡混匀后备用，不使用时放于-20°C储存，反复冻融应不多于3次。
四、实验操作
〖试剂〗 〖每孔用量〗
〖检测稀释液〗 〖90 ul〗
〖样品/对照〗 〖10 ul〗
〖酶标二抗〗 〖100 ul〗
〖1X洗板液〗 〖2 ml〗
〖底物〗 〖100 ul〗
〖终止液〗 〖100 ul〗
1.实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出回复室温；
2.设置好对照及样品在抗原包被板的位置，所有孔中加入90ul 检测稀释液；
3.加入10ul的阳性对照到抗原包被板两个孔中；
4.加入10ul的阴性对照到抗原包被板的另外两个孔中；（强烈建议将阴性和阳性对照血清分隔加入，例如左上方加阳性对照，右下方加阴性对照）
5.其他孔加入10ul预稀释的血清样品（已经预稀释了1:10）.
6.轻微振荡1分钟；
7.封板，25°C孵育45分钟；（注意避免阳光直射和空气进入板中）
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