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河南效胜实业有限公司
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河南专业科研细胞实验技术服务石蜡切片/冰冻切片实验-效胜实业 |
效胜实业河南专业科研细胞实验技术服务石蜡切片/冰冻切片实验
本公司开展了石蜡包埋、石蜡切片、冰冻切片、HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫组化,免疫荧光,WB .PCR.透射电镜,扫描电镜,细胞培养等实验服务服务介绍
1)技术原理:
石蜡切片(paraffin section)是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。
冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断
2)特点:
石蜡切片标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。
冰冻切片制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断.组织变化不大,能很好保存脂肪,类脂等成分。能够比较完好地保存各种抗原活性及酶类,特别是对于那些对有机溶剂或热的温度耐受能力较差的细胞膜表面抗原和水解酶保存较好。
石蜡切片
(一)石蜡切片前的准备
1.切片刀。传统的切片刀在使用之前,一定要在显微镜下检查刀口的损伤程度,然后进行磨刀。现在也可以使用一次性刀片,可省去磨刀。
2.修整蜡块:切去组织周围过多的石蜡,一般情况下在组织周围留有约1~2mm的石蜡边,两边必须平行。
3.蜡块固定:修整好的蜡块先固定在事先准备好的小方木块或者金属块上,固定方法是把蜡铲先在酒精灯上加热,再将蜡块底部烙熔,迅速烙粘在小方木块或金属块底座上。
4.载玻片擦洗干净后,在其表面涂上粘附剂(蛋白甘油、APES或多聚赖氨酸),根据染色方法选择不同的粘附剂。
5.准备好毛笔、镊子、染色架。
6.调好展片器内水的温度(45℃),有时也可以加些酒精到水中。
(二)石蜡切片
1.将切片刀装在刀片机的刀架上并固定紧,固定蜡块底座或蜡块,调整蜡块与刀至合适位置,刀刃与蜡块表面呈5度角。
2.切片多使用轮转式切片机,切片时,左手执毛笔,右手转切片机转轮,先修出组织块。
3.调整切片机上 |
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