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马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)的应用!

详细说明

    马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)的应用!



一、概述



马铃薯葡萄糖琼脂是食用菌母种*常用培养基之一,可用于霉菌,酵母菌计数。配方如下:马铃薯200g制成浸出液,葡萄糖20g,琼脂15〜20g,水1000mL,不调节pH。制备方法如下:取新鲜马铃薯200g,洗净去皮切成小块,加水煮沸20〜30min(能被玻璃棒戳破即可),然后用四层纱布过滤,再根据需要加入葡萄糖或蔗糖20g和琼脂15〜20g,继续加热搅匀,稍冷却后补足水分至1000mL制备PDA培养基有时可加入氯霉素或土霉素等抑制细菌的生长,减少干扰。若不加琼月旨,可用于真菌的液体培养。



二、产品用法



称取本品 46.0g,加入 1000ml 蒸馏水中,115℃高压灭菌 20分钟,备用。灭菌好的培养基仅可重复加热熔化一次。



三、微生物灵敏度试验



按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置20-25℃需氧培养48-72小时。注:回收率计算时,用SDA 琼脂做对照培养基。





四、制备



其配方为马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克,水1000毫升。制作时先将马铃薯去皮,洗净,发芽薯块要挖去芽眼(因芽眼处含龙葵碱,有毒),切成薄片,加水煮沸直至软而不烂,用8层纱布(经浸湿拧干)过滤取汁。然后将浸水漂洗并拧干的琼脂加入马铃薯液汁中,煮至全部融化,再用纱布过滤,加水补足至1000毫升。*后加葡萄糖搅拌溶化后分装试管、灭菌。本培养基适用于培养和保藏各种食用菌。



五、应用



CN201110315661提供一种桑黄菌丝体的制备方法。步骤包括:桑黄菌种活化;马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板培养;刮取桑黄菌丝体接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中进行振荡培养;收集桑黄菌丝体;提取桑黄菌丝体总RNA;琼脂糖凝胶电泳观察结果。本发明使用的菌种是保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)桑黄菌种(鲍姆层孔菌,保藏号为桑黄DL101 CCTCC M 2011137)。本发明操作简单,原理易懂,为今后获得大规模的、高纯度的桑黄菌丝体和高质量的桑黄总RNA提供了简便快捷的方法,也为桑黄的基础研究和应用开发奠定了基础。



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