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异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)简介
异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)为白色粉末,是一种作用极强的诱导剂,溶于水后呈清亮无
色液体。用于原核表达系统,使其表达量增高,产物稳定。
异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)使用方法
首先把IPTG配制成23.83 mg/ml(100 mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100
ml的琼脂培养基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰
胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。
当DNA的片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失
细胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方
便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。
异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作用
诱导外源基因的表达,普遍应用于原核表达系统,使其表达量增高,产物稳定,具有易鉴
定,易纯化的优点。
异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导物的牛乳糖活动在许多细菌。功能模拟,异丙基硫代半
乳糖苷(IPTG)诱导牛乳糖活动抑制,抑制因子。从nonrecombinants IPTG用于区分重组
克隆策略使用向量包含Z或Z肽基因。在水中溶解异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)在200毫克/
毫升。消毒的解决方案通过一个0.2μm过滤器,分发小整除和存储在-20°C。使用250 -
350年的*终浓度μg /毫升琼脂和液体的文化。特定的应用程序可能需要或多或少IPTG。
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