步骤1. 目标基因全基因合成：
从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。如果我们的cDNA文库中有这个基因，我们免费提供给客户。
根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化，密码子优化。
合成设计好的基因序列。
提供给客户：目标基因（在T载体或常规穿梭载体上）及测序报告。
价格：3.80元/碱基,如果客户直接提供构建好的质粒，则免去这部分费用．
时间：2~3周，根据基因的大小而定.详见全基因合成服务
步骤2. 目标基因亚克隆：
扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。
将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。
测序验证构建质粒的准确性。提供给客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。
价格：免费
时间：1-2周
步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选：
扩增并抽提构建好的表达质粒。
将表达质粒转化到高效的E.Coli表达菌株中。
至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。
SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
可提供表达菌株：DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。 |
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