免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blot),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。
客户提供:
样品要求: 组织样品,每份样品约250-500mg, 新鲜或者正确保存的。
细胞样品,每份样品约1×106-1×107细胞数。
客户需提供有效的一抗, 或由公司代购进口原装抗体.( 以国外文献中应用的相关*一抗体为佳)
客户需提供要检测目的蛋白的详细背景资料。
操作步骤:
蛋白质提取
蛋白质定量
变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE)
蛋白质转移到硝酸纤维膜或PVDF膜,转移过夜
western blot 膜的封闭和抗体孵育
结果检测:化学发光法检测,显色,曝光,显影定影
数据分析
提供实验报告和相关数据
费用标准:1200元/张膜 (每张膜只做一种目的蛋白,每张膜可做8个样品,不足8个按8个算)
完成时间:2-3 周 (不包含订购一抗的时间,订购一抗约3-4周) |
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