为了维持一定的温度湿度，恒温恒湿室需要建成为较为封闭的空间，但室内封闭的同时依然需要新鲜空气的流入，一是为了维持室内人员的正常呼吸，二是为了维持室内的气压为正，防止外界空气流入，干扰室内温度湿度。
恒温恒湿室内正常都会有工作人员，来监督室内的温湿度，观察实验对象，控制检测过程等。这些工作人员正常呼吸工作需要新鲜的空气，而用于实验的微生物、细菌等的存活也有赖于空气。必须在不影响室内温湿度的情况下时常为室内注入新鲜的空气。
恒温恒湿室内的温湿度恒定，非常害怕有外界的空气流入，南京低湿实验室干扰室内的实验环境。同时，外界空气也会带入一些其他的微生物、细菌等影响实验对象，所以必须有专门的通风换气系统，有效的维持室内的气压为正，来防止这种现象的发生。
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