动物组织AB-PAS染色观察糖原实验报告-上海郑核
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 Servicebio
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
AB-PAS染液套装 Servicebio G1049
苏木素染液 servicebio G1004
分化液 servicebio G1005-3
返蓝液 servicebio G1005-4
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、阿利新蓝染色:切片入阿利新蓝染液中染色5min,自来水洗2min;
3、高碘酸染色:切片入高碘酸染液中15min,自来水洗,蒸馏水洗两遍;
4、雪弗染色:切片入雪弗染液避光染色30min,,流水冲洗5min;
5、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
6、脱水封片:切片依次入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
7、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:
酸性粘液物质呈蓝色,糖原,中性粘液物质呈紫红色,混合黏液物质呈紫蓝色或蓝紫色。
四、注意事项:
1、高碘酸要经常更换,避免影响染色效果。
2、雪弗染色时要避光。
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