样品要求
蛋白样品-80℃保存,干冰寄送,下单前请先和工作人员沟通,确认测试细节。
常见问题
1:适配子DNA单链,可以用带有互补链的磁珠进行pull down吗?如果可以,效率怎么样?一般需要怎么优化条件?
理论上说,若DNA单链能够与磁珠上的互补链杂交成功,是可以进行pull down实验的; 效率如何不好确定,这个取决于两条DNA单链是否能杂交成功、蛋白-DNA结合的强弱、蛋白的丰度等。
2:DNA pull down的 原理?
针对目标区域设计特异性DNA探针并进行生物素标记,生物素探针可与偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞蛋白提取物与磁珠-DNA探针孵育,从而钓取与DNA探针有特异性结合的互作蛋白质。
3:你们对外服务的检测项目有哪些?
细胞、动物/植物组织、菌体都可以做DNA pull down, 我们还可以做的检测实验具体如下:
(1) RNA-蛋白/RNA互作及定位:RNA pull down、RIP、fish等;
(2) DNA-蛋白互作:DNA pull down、ChIP、EMSA、双荧光素酶、酵母单杂等;
(3) 蛋白-蛋白互作:GST/his pull down、CoIP、酵母双杂等;
(4) 细胞学检测:细胞增殖-MTT/CCK-8, 细胞凋亡, 细胞周期,细胞迁移、侵袭:划痕愈合/Transwell/Transwell(Matrigel)等;
4:效率有多高?
效率主要取决于蛋白-DNA结合的强弱、蛋白的丰度等。
5:老师,对照组的DNA序列是怎么选择的?
一般对照组是没有探针的,对照组是磁珠beads+蛋白 |